Delecje genów interferonu w ostrej białaczce limfoblastycznej ad

Całkowitą delecję lub hemizygotyczność genów interferonu określono przez wizualną inspekcję autoradiografów po sekwencyjnej hybrydyzacji tego samego błota z sondami interferon-., interferon-.1 i kontrolnymi. W celu obiektywnej oceny dawkowania genów, wszystkie próbki sklasyfikowane jako hemizygotyczne lub homozygotyczne delecje na Southern blot i niektóre próbki bez delecji dalej analizowano przez hybrydyzację dot-blot i densytometrię autoradiogramów. Przygotowanie DNA, transfer typu Southerna, dot blotting, hybrydyzację i autoradiografię przeprowadzono jak opisano wcześniej Wyniki
Charakterystyka populacji badawczej
Spośród 62 badanych pacjentów 36 (58%) było mężczyznami, a 26 (42%) było płci żeńskiej. Mediana wieku wynosiła 14 lat; 44 (71 procent) miało mniej niż 18 lat. Pięćdziesięciu siedmiu pacjentów (92 procent) miało klonalne anomalie chromosomalne w swoich komórkach białaczkowych, a 5 (8 procent) miało prawidłowe kariotypie. Czterdziestu czterech pacjentów (71 procent) miało co najmniej jedną rozpoznaną nawracającą nieprawidłowość związaną z ALL: 7 pacjentów miało hiperdiploidalny kariotyp z ponad 50 chromosomami; 7 pacjentów miało (9; 22) (q34; qll); 5 pacjentów miało (4; 11) (q21; q23); 6 pacjentów miało delecję 6q (jeden z tych pacjentów miał również (4; II), 2 pacjentów miało der (19) t (l; 19) (q23, pl3), 4 pacjentów miało translokacje obejmujące 14q32; pacjenci mieli delecję lub niezrównoważoną translokację obejmującą 9p (jeden z tych pacjentów miał również (9, 22)) .4 Czterech pacjentów miało inne nawracające nieprawidłowości, a 13 pacjentów (21 procent) miało nienormalne nieprawidłowości.
Analiza genów interferonu
Tabela 1. Tabela 1. Cytogenetyczne cechy pacjentów z ALL i delecjami genów interferonu. Rysunek 1. Rycina 1. Southern Blots of DNA z komórek białaczki pacjentów z ALL. DNA strawiono enzymem restrykcyjnym Hindlll. Filtry hybrydyzowano kolejno do interferonu-. (A), interferonu.1 (B) i sond genowych receptora transferyny (C). Ścieżka P reprezentuje DNA z normalnego ludzkiego łożyska; ścieżka B, DNA z linii komórkowej BV173 (przewlekła białaczka szpikowa, ostra faza), które nie ma delecji genu interferonu; i ścieżkę S, DNA z linii komórkowej SUP-T3, które ma całkowitą delecję genów interferonowych i interferonu-.1. Ścieżki aib przedstawiają DNA z komórek białaczkowych dwóch pacjentów, którzy mieli geny ALL i normalne interferony. Ścieżki 4, 2, i 3 reprezentują DNA z komórek białaczkowych odpowiednio dla Pacjentów 4, 2, i 3, z których wszystkie mają delecje genów interferonu. Próbka od Pacjenta 3 ma tylko 68 procent komórek blastycznych i dlatego wykazuje znaczną hybrydyzację z genami interferonu z normalnych komórek. Ścieżka r przedstawia DNA z komórek krwi obwodowej otrzymanych od Pacjenta podczas całkowitej remisji.
Figura 2. Figura 2. Dot Blot DNA z BV173, linia komórkowa z normalnym uzupełnieniem genów interferonu i z białaczkowych komórek dwóch pacjentów z Hemizygotyczną delecją genów Interferon-. i interferon-.1. Dla każdej próbki załadowano trzy szeregi DNA w rzędzie. Dane dot-blot hybrydyzowano kolejno z interferonem-. (A), interferonem-.1 (B) i sondą genową receptora transferyny (C).
Delecje genów interferonu-., genu interferonu-.1 lub oba zaobserwowano u 18 z 62 pacjentów z ALL (29 procent)
[patrz też: olx witkowo, jagody goji działanie, olx sokółka ]