Delecje genów interferonu w ostrej białaczce limfoblastycznej

SZCZEGÓLNE anomalie chromosomalne związane z chorobami nowotworowymi wydają się być zaangażowane w proces onkogenny w wyniku modyfikacji normalnych genów komórkowych, które tworzą dominujące onkogeny lub utratę dominujących genów supresorowych dla guza. Wśród pacjentów z ostrą białaczką limfoblastyczną (ALL) zgłaszano delecje lub niezrównoważone translokacje krótkiego ramienia chromosomu 9 o częstotliwościach od 7 do 13 procent.1 2 3 4 Najmniejszy segment utracony u każdego pacjenta obejmuje pasmo 9p22. Ten region chromosomu 9 zawiera klaster genów interferonu-. i gen interferonu-.1.5 Wcześniej opisywaliśmy homozygotyczną lub hemizygotyczną delecję gromady interferonu in vitro w 7 z 15 linii komórkowych (47 procent) pochodzących od pacjentów z ALL.6. Cztery z tych delecji genów były związane z widocznymi delecjami cytogenetycznymi lub innymi rearanżacjami 9p; w trzech innych przypadkach delecje były jednak submikroskopowe. Wyniki te pokazują, że zmiany genetyczne w tym regionie 9p występują z wyższą częstością występowania w liniach komórkowych ALL niż wynika to z częstości wykrywalnych nieprawidłowości cytogenetycznych 9p.
Aby ustalić, czy delecje genu interferonu są związane z procesem białaczki in vivo, przeanalizowaliśmy próbki komórek pierwotnej białaczki od 62 pacjentów z ALL; teraz informujemy, że delecje genów interferonu występują często u pacjentów z tą złośliwą chorobą.
Metody
Pacjenci
Przebadaliśmy 62 pacjentów przyjętych do kilku szpitali w Chicago w celu rozpoznania i leczenia ALL w latach 1982-1988. Pacjenci zostali wybrani do badania, jeżeli próbki krwi szpikowej lub krwi obwodowej zebrane podczas diagnozy zawierającej ponad 60 procent komórek blastycznych były dostępne dla badań cytogenetycznych i klinicznych. Analiza DNA. Pobrano również próbkę krwi obwodowej uzyskaną podczas pierwszej remisji (Pacjent 1). Dane kliniczne zebrano retrospektywnie, przeglądając dokumentację medyczną. Prezentujemy również informacje o pacjencie, którego badaliśmy wcześniej (Pacjent 19) .6
Analiza cytogenetyczna
Analizę cytogenetyczną wykonano techniką bandowania trypsyna-Giemsa na świeżych próbkach szpiku kostnego lub krwi obwodowej uzyskanych w momencie rozpoznania. Badaliśmy komórki metafazowe z krótkotrwałych (24- i 48-godzinnych) niestymulowanych kultur. Nieprawidłowości chromosomowe zostały opisane zgodnie z międzynarodowym systemem nomenklatury ludzkiej cytogenetycznej.7
Sondy DNA
Użyte sondy były klonem cDNA ludzkiego genu interferonu. 1, klonu cDNA ludzkiego genu interferonu-a2, który krzyżowo hybrydyzuje ze wszystkimi genami rodziny genów interferon-a1 i częściowego klonu cDNA genu receptora transferyny. , który służył jako kontrola; gen receptora transferyny znajduje się na ludzkim chromosomie 3. Ludzkie wstawki DNA oddzielono od sekwencji wektora przez trawienie restrykcyjną endonukleazą i znakowano trifosforanem deoksycytydyny w opisany powyżej sposób 6.
Analiza DNA
Komórki przechowywano w 10% dimetylosulfotlenku i zamrażano w -70 ° C lub w ciekłym azocie przed ekstrakcją DNA i analizą metodą hybrydyzacji typu Southerna.
[hasła pokrewne: jagody goji działanie, jaskolcze ziele, inteligencja emocjonalna pdf ]